本研究測試了腸桿菌肽-羅伊氏菌素復合物、羅伊氏乳桿菌對肉雞的生長(cháng)性能、盲腸微生物群落組成和代謝物的影響。結果表明0.08 μmol/L腸桿菌肽聯(lián)合5 mmol/L羅伊氏菌素（10RJ）可促進(jìn)腸道有益菌的增值并改變腸道代謝組，這種無(wú)抗組合顯著(zhù)改善肉雞生長(cháng)性能，達到了抗生素類(lèi)似效果，適合作為抗生素生長(cháng)促進(jìn)劑的替代品。
1、前言
腸道微生物群落具有促進(jìn)免疫健康，改善飼料消化和養分吸收，改善食品性動(dòng)物生長(cháng)性能的重要作用?？股卦趧?dòng)物生產(chǎn)中的持續使用導致了病原體的耐藥性。因此，科學(xué)家們正在不斷地尋找抗生素的天然替代品?？咕氖且环N蛋白質(zhì)類(lèi)分子，通過(guò)在細胞膜上形成氣孔或抑制細胞壁的合成，產(chǎn)生抑菌或殺菌活性。腸桿菌肽對包括大腸桿菌和沙門(mén)氏菌在內的幾種革蘭氏陰性病原菌具有殺菌作用。其獨特的套索結構使其對熱變性和應激性胃腸道疾病具有很強的抵抗力。由于這些特點(diǎn)，腸桿菌肽已被研究作為肉雞生產(chǎn)中常規抗生素生長(cháng)促進(jìn)劑的替代品。益生菌的優(yōu)勢特征包括在胃腸道中存活和定植，以及分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶。羅伊氏乳桿菌在適宜的培養條件下，能將甘油轉化為羅伊氏菌素，這是一種對革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性細菌有很強抑制作用的水溶性抑制劑，在較寬的pH范圍內不受水解酶的影響。目前還沒(méi)有研究羅伊氏菌素和腸桿菌肽聯(lián)合應用對肉雞生長(cháng)的影響。聯(lián)合使用可能會(huì )降低每種抗菌化合物的有效使用濃度，而且不易出現耐藥性。在我們之前的研究中，與單獨使用它們相比，低濃度的羅伊氏菌素和腸桿菌肽（RJ）組合已經(jīng)被證明在減少雞身體上的腸沙門(mén)氏菌數量方面具有協(xié)同作用。
2、材料和方法
2.1 試驗動(dòng)物與試驗設計
選用1日齡科寶肉雞（公雞2176只），隨機分為8個(gè)處理組。每個(gè)處理由8個(gè)重復組成，每個(gè)重復34只雞，飼養35d。試驗期間動(dòng)物自由采食。溫度和照明按照行業(yè)建議進(jìn)行控制。每小時(shí)記錄一次溫度和水分含量。
（注：0.08 μmol/L腸桿菌肽=0.168μg/L腸桿菌肽，即每噸水添加腸桿菌肽168克）
2.2 試驗測定指標
每欄記錄每個(gè)生長(cháng)階段的采食量和飼料轉化率。分別在第0、7、10、22、35天測量體重和平均日增重。死亡率每天都有記錄。盲腸代謝組分析、盲腸微生物DNA的提取與分析（詳情見(jiàn)原文）。
3、結果
3.1 生長(cháng)性能
試驗處理對肉雞的體重、采食量、平均日增重、飼料轉化率和死亡率的影響如表1所示。與陰性對照組（NC組）相比，陽(yáng)性對照組（PC組）和10RJ組的采食量、體重和平均日增重顯著(zhù)提高（P<0.05）。除E6Lr組外，NC組的病死率與其他組無(wú)顯著(zhù)差異（P>0.05）。由于1RJ、5RJ和羅伊氏乳桿菌處理組與NC組無(wú)顯著(zhù)差異，且無(wú)正向促生長(cháng)作用，因此進(jìn)一步的研究比較分析集中在10RJ處理組。
3.2 盲腸內容物的微生物組成
PCoA圖中，圓圈表示樣品的聚集和分散程度，圈與圈之間越接近表明物種組成越相似。PCoA表明，陰性對照組與陽(yáng)性對照組、10RJ組組成不同。
shannon值（香農指數）越大表示微生物多樣性越高。香農指數在不同處理之間沒(méi)有顯著(zhù)的統計差異，這表物種豐富度可能是差異的驅動(dòng)因素。
在門(mén)水平鑒定出的前5個(gè)門(mén)分別是厚壁菌門(mén)（Firmicutes），擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes），軟壁菌門(mén)（Tenericutes），變形菌門(mén)（Proteobacteria），放線(xiàn)菌門(mén)（Actinobacteria）。相比NC組，PC組和10RJ組的厚壁菌門(mén)、擬桿菌門(mén)升高，變形菌門(mén)降低。
在科水平，理研菌科（Rikenellaceae）在陰性對照組中最多，瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）和毛螺菌科（Lachnospiraceae）在PC和10RJ組最多。
在OTU水平，盲腸共有2970個(gè)物種水平的OTU。陽(yáng)性對照組和10RJ組均減少了OTU 2-Alistipes（P<0.05）。Alistipes是擬桿菌門(mén)的一個(gè)亞屬，而擬桿菌門(mén)通常與人類(lèi)慢性腸道炎癥有關(guān)，10RJ處理可以降低盲腸被此類(lèi)病原體污染的風(fēng)險，從而有助于保持良好的屠體質(zhì)量。
在屬水平用網(wǎng)絡(luò )分析研究了菌群間連通性。乳桿菌和擬桿菌豐度較高，連通性強，并與其他多個(gè)菌有相互作用。
眾所周知，腸道微生物組成了一個(gè)與宿主具有共生關(guān)系的復雜生態(tài)系統，在免疫系統中發(fā)揮著(zhù)重要作用。腸道菌群組成的變化影響宿主的代謝。
3.3 盲腸內容物中的微生物代謝物
抗生素組和10RJ組對微生物代謝物的影響不同。在10RJ組，乙酸、丙酸和丁酸等短鏈脂肪酸（SCFA）含量都比陰性對照組高，而抗生素組所有短鏈脂肪酸的濃度都低于陰性對照組。短鏈脂肪酸是腸道微生物碳水化合物代謝的主要產(chǎn)物，是微生物活性的指標。10RJ處理創(chuàng )造了一個(gè)對宿主友好的腸道環(huán)境（A）。偏最小二乘回歸圖（PLS-DA）不同顏色表示不同組別，距離越遠表明組間差異越大。圖中可以看出抗生素和10RJ改變了肉雞腸道微生物代謝組。而與抗生素相比，10RJ可被視為對家禽腸道健康和整體性能更有利（B）。
4、結論
0.08 μmol/L腸桿菌肽聯(lián)合5 mmol/L羅伊氏菌素（10RJ）可促進(jìn)腸道有益菌的增值并改變腸道代謝組，這種無(wú)抗組合顯著(zhù)改善肉雞生長(cháng)性能，達到了抗生素類(lèi)似效果，適合作為抗生素生長(cháng)促進(jìn)劑的替代品。
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